Im Super Mario Galaxy Film lösen Mario und Luigi mit ihrer "Let's-a-go"-Einstellung alltägliche Probleme im Pilzkönigreich. Sie lernen ihren Freund Yoshi kennen, versuchen, einen kleinen Bowser zu bekehren, und freuen sich auf Peachs Geburtstagsfeier. Ein Hilferuf schickt die Crew durch die Galaxie, wo sie neuen Welten, Bedrohungen und ikonischen Figuren wie Rosalina und Bowser Jr. begegnet.